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    液相色譜儀器使用小貼士
    發布日期:2015-02-26   瀏覽次數:2559次   液相色譜儀

      清潔是保持流動相貯液瓶正常使用的關鍵,使用LCMS級的溶劑和試劑。陳舊的流動相和用久了的試劑應定期廢棄,防止生長微生物和組分改變。貯液瓶內壁定期清洗,流動相濾頭定期清洗或更換。

      液相泵的日常維護

      泵的密封圈是最易磨損的部件,密封圈的損壞可能引發漏液或劇烈壓力波動;單向閥的正常工作至關重要,它若發生故障,將直接影響流速的穩定性。

      日常維護應注意以下幾點:

      ①使用LCMS級的溶劑和試劑;

      ②確保系統壓力在正常范圍;

      ③使用完緩沖液體系后用純水沖洗干凈,防止鹽沉積,系統不運行時應存儲在無緩沖液的溶液或有機溶劑中;

      ④密封圈按照各個生產廠商的建議定期更換。

      進樣器的日常維護

      樣品預處理對于防止進樣針和進樣閥堵塞至關重要。

      預處理常用方法:

      ①超濾;

      ②溶劑萃取/去鹽;

      ③固相萃取;

      ④灌注凈化/去鹽;

      ⑤色譜分離;

      ⑥甲醇或乙腈沉淀蛋白;

      ⑦酸水解,酶解;

      ⑧衍生化。

      色譜柱的維護和保存

      ①每次工作結束,用高比例強溶劑沖洗色譜柱,沖去留在柱上的強吸附組分;

      ②凈化樣品,樣品中的微粒會進入色譜柱,在柱頭上沉積下來,造成柱壓升高,柱效降低;

      ③避免撞擊色譜柱,如掉落或超聲震蕩;

      ④柱壓避免急劇變化;

      ⑤反相柱C18應保存在純有機相或50%有機相中,一周不用要卸下,兩端用堵頭密封,避免干枯。

      流動相的選擇

      LCMS常用的流動相為甲醇、乙腈、水和它們不同比例的混合物以及一些易揮發鹽的緩沖液,如甲酸銨、乙酸銨等,還可以加入易揮發酸堿如甲酸、乙酸或氨水等調節pH值;LCMS體系要避免使用含磷或氯的緩沖液,含鈉和鉀的成分必須<1mmol/l。(鹽分太高會抑制離子源的信號和堵塞噴霧針及污染接口)含甲酸(或乙酸)<2%,含三氟乙酸<0.5%,含三乙胺<1%,含醋酸銨<10—5 mmol/l。

      樣品的預處理

      從保護儀器角度出發,防止固體小顆粒堵塞進樣管道和噴霧針,防止污染MS,降低分析背景,排除對分析結果的干擾;從ESI電離得過程分析看,電荷聚集在液滴的表面,樣品和雜質在液滴表面相互競爭,不揮發物(如磷酸鹽等)妨礙帶電液滴揮發,大量雜質妨礙帶電樣品離子氣化,增加電荷中和的可能。

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